大賽璐手性柱是由具有光學(xué)活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過(guò)引入手性環(huán)境使對(duì)映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達(dá)到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的。
確認(rèn)儀器各部件狀態(tài):
校準(zhǔn)各泵的流速看是否準(zhǔn)確。
使用溶劑及配制:
a)使用的有機(jī)溶劑(流動(dòng)相)均為色譜級(jí)。
b)配制流動(dòng)相時(shí),請(qǐng)充分振蕩混合均勻,并且超聲排除氣泡。
c)若在流動(dòng)相中添加了帶電荷的添加劑(例如:DMOA:N,N-Dimethyloctylamine,HFBA:Heptafluorobutyricacid,OA:Octanoicacid),則這根大賽璐手性柱以后的實(shí)驗(yàn)中也應(yīng)該一直使用帶電荷的添加劑,否則實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可能不準(zhǔn)確。
樣品的配制:
a)通常使用純水溶解樣品,或者85%以上的水和15%以內(nèi)的有機(jī)相(有機(jī)相為甲醇,乙醇,異丙醇和乙腈,和流動(dòng)相中的有機(jī)相成分相同)的混合溶劑。一般不能使用100%的甲醇,乙醇,異丙醇和乙腈溶解樣品。若溶解樣品的溶劑與流動(dòng)相組分差別過(guò)大,需要特別注意會(huì)出現(xiàn)樣品結(jié)晶析出的可能,一般表現(xiàn)為柱壓升高,峰型不正常等現(xiàn)象。
b)請(qǐng)?jiān)谂錁忧按_認(rèn)樣品里有沒(méi)有殘留對(duì)大賽璐手性柱有損傷性的有機(jī)溶劑或其他雜質(zhì)(如:與蛋白質(zhì)有強(qiáng)吸附作用力的化學(xué)物質(zhì))。
c)樣品溶解后,需要用有機(jī)相過(guò)濾膜(通常為0.45µm)過(guò)濾。